尊龙凯时的包被细胞培养瓶试剂是一种用于处理培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,旨在模拟细胞在生物体内的生长环境,从而促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面能够更有效地支持细胞的生长和功能表达。以下将详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作中的注意事项,以助您提升细胞培养效果。
常见的包被试剂及使用方法
01 明胶(Gelatin)
明胶是一种常用的包被细胞培养板或培养皿的试剂,能有效促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适用于胚胎干细胞、间充质干细胞和内皮细胞等多种细胞类型。特点包括价格低廉、操作简便、能够提供良好的细胞附着支持。
使用浓度为1-20mg/ml,包被体积通常以完全覆盖培养瓶底部为准,以T-25瓶为例,需使用25ml的明胶溶液。包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。在接种细胞前,需吸除多余的明胶溶液,并用PBS清洗1-2次。
02 多聚赖氨酸(PLL)
多聚赖氨酸是一种相对分子量为70,000~300,000的细胞粘附剂,常被用作细胞培养的生长基质。它通过静电作用增强细胞的附着能力,非常适合一些难以贴壁的细胞如神经元、原代细胞和悬浮细胞等。常用浓度为0.01%至0.1% (w/v)。包被条件同样为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜,使用前需吸除多余溶液并用无菌PBS冲洗1-2次。
03 重组人纤连蛋白(FN)
重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,因其具有多种生物学功能,适用于干细胞、间充质干细胞及肿瘤细胞的培养。用作细胞培养基质时,它能显著提高细胞的贴壁率和代谢水平,并缩短细胞的生长时间。常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²,包被条件为37°C孵育≥2小时,或4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液
鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,广泛应用于内皮细胞、肝细胞和肌肉细胞的培养,模拟细胞外基质的环境。适用于上皮细胞、肝细胞及肌细胞等。其特点是能够形成清晰的凝胶,并提供三维基质或表面涂层,促进细胞的贴壁和增殖。常用浓度为1-5µg/cm²,包被体积可按如下配比:在T-25瓶中使用25ml的去离子水与50µl的1mg/ml鼠尾胶原蛋白Ⅰ混合,随后置于4°C过夜,最后吸出溶液,用PBS洗涤2-3次后接种细胞。
包被操作注意事项
在进行细胞培养时,遵循以下注意事项可确保最佳效果:
- 无菌操作:所有操作需在无菌条件下进行,防止污染。
- 均匀覆盖:确保包被试剂均匀分布,避免局部过厚或过薄。
- 浓度优化:根据细胞类型和实验需求调整包被试剂的浓度。
- 孵育时间:根据试剂特性和实验要求适当调整孵育时间,以确保充分包被。
- 储存条件:包被后的培养瓶可短期储存于4°C,但建议尽快使用以保证最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循正确的操作步骤,您可以有效提升细胞的贴附与生长,为后续的实验提供可靠的细胞模型,这也是尊龙凯时致力于为您提供的优质产品与服务。通过专业的支持,助力您的生物医疗研究。