培养条件：

气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

传代方法：

第一次：建议1:2传代。距离上次传代建议间隔2天更换培养基。

备注：建议同时购买相关培养用品，尊龙凯时提供非常优惠的套餐。

细胞处理：收到细胞后，请勿立刻打开培养瓶。请及时核对瓶上标注的细胞名称与订单是否一致，并检查瓶是否有破损或泄漏。如果未发现异常情况，通过显微镜观察细胞生长状态并拍照（建议40x、100x、200x各一张）。前三天的照片将作为重要的售后依据，不提供照片则默认收到的状态良好。

贴壁细胞传代步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS洗涤细胞1-2次。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱内消化1-2分钟，观察细胞是否变圆后，轻敲几下瓶子加5ml以上完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清，重悬在1-2ml完全培养基中。

4. 将细胞悬液按1:2比例分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞的传代步骤如下：

1. 半换液法：竖着放置培养瓶静置约1小时，吸去约3ml培养基，然后补充3ml完全培养基，若培养基变色可添加500ul左右FBS。传代时可直接补充5ml培养基，分到两个新的培养瓶中，通常这样处理3次后可离心传代一次，去除死细胞。

2. 离心换液法：将细胞悬液收集于离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养液后重悬，按1:2比例分瓶至新T25瓶中，添加6-8ml新的完全培养基保持细胞活力，后续根据实际情况进行传代。

尊龙凯时致力于提供高质量细胞培养产品，保障您的细胞生长健康。在细胞生长过程中，若遇到任何问题，请及时联系我们，我们将竭诚为您服务，确保您获得最佳的实验结果。